ELISA試劑盒在的實(shí)踐運(yùn)用中，通過不同的規(guī)劃，詳細(xì)的方法步驟可有多種。如雙抗體夾心法、間接法、競爭法、雙位點(diǎn)一步法、捕獲法測(cè)IgM抗體、運(yùn)用親和素和生物素的ELISA。在今天的技術(shù)內(nèi)容中，上海通蔚生物公司為您詳解ELISA方法規(guī)劃的原理依據(jù)。
ELISA試劑盒以免疫學(xué)反應(yīng)為根底，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗刷除去剩余的游離反應(yīng)物，從而確保試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。
運(yùn)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本水平。用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入，再與HRP符號(hào)的抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，通過*洗刷后加底物TMB顯色。
ELISA試劑盒TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(OD值)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線核算樣品的濃度。
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